![]() |
Ярпортал: форум Ярославля ![]() |
![]() ![]() ![]() |
Здравствуйте, Гость ( Вход·Регистрация ) | Сделать Yarportal.Ru стартовой страницей |
![]() |
Страницы: (4128) « Первая ... 1338 1339 [1340] 1341 1342 ... Последняя » ( Перейти к первому непрочитанному сообщению ) | ![]() ![]() ![]() |
Mondoro |
Дата 13.11.2020 - 15:27
|
![]() Hey You ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() Профиль Группа: Пользователи Сообщений: 1549 Пользователь №: 23846 Регистрация: 16.09.2007 - 11:38 ![]() |
Граждане, успокойтеся... В "Пяторочке" уже была вакцина "ПОРТОВЕЙН" назывался рублей по 60 за 0,7. Вирус сразу себе харакири делает, благодаря названию, даже не дочитав состав...
![]() |
ММГ |
Дата 13.11.2020 - 15:31
|
Unregistered ![]() |
А портюшки хорошего испити в удовольствие..
|
|
night butterfly |
Дата 13.11.2020 - 15:40
|
||||
Unregistered ![]() |
Не усложняйте, анализы методом ПЦР не только при ковиде же берут, обучить можно лаборанта и после колледжа, было бы желание. Тем более, сейчас же автоматизировано все, не нужно сидеть над микроскопом. |
||||
|
Yuip |
Дата 13.11.2020 - 15:59
|
||
Unregistered ![]() |
Лучше 5 капель коньяку в кофе или чай. Для согрева) |
||
|
Жирный Принц |
Дата 13.11.2020 - 16:00
|
В малиновых штанах ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() Профиль Группа: Пользователи Сообщений: 4282 Пользователь №: 184908 Регистрация: 13.10.2015 - 02:59 ![]() |
Любаня хотела пощитать вирусные частицы в крови. Вона тута любой разберется ) Эт основы диагностики ПЦР >
Эт Лабораторная диагностика на примере атипичной пневмонии > Вот немного оттуда > 5. Проведение анализа 5.1. Первичная подготовка проб. Контейнер (герметичную тару, бикс) с доставленными на исследования пробами устанавливают в поддон, в бокс безопасности на 35-40 мин. Затем осторожно открывают крышку контейнера и, убедившись в целостности емкости(ей) с материалом, выставляют их на поддон предварительно обработав снаружи дезраствором. Емкости маркируют и регистрируют (лист регистрации выносят из «заразной» зоны только после обработки погружением в дезинфицирующий раствор). 5.2. Выделение РНК В микроцентрифужные пробирки с завинчивающейся крышкой, содержащие 450 мкл лизирующего буфера 1, вносят по 100 мкл исследуемых проб, перемешивают и инкубируют при 65° С в течение 10 мин на твердотельном термостате. Оставшийся материал помещают в холодильник на минус 20° С для хранения. Использованные пробирки и наконечники, супернатант помещают в емкость, заполненную на 1/3 объема 0,1 N раствором гидроокиси натрия. Затем в пробирку вносят 30 мкл нуклеосорбента, периодически встряхивают на вортексе (микроцентрифуге/встряхивателе) в течение 5 мин. После этого центрифугируют при 8000 g в течение 30 сек., супернатант удаляют , а к осадку добавляют 300 мкл буфера 2. Содержимое пробирки вновь перемешивают на вортексе до гомогенного состояния, центрифугируют при 8000 g в течение 30 сек., супернатант отбирают, а к осадку добавляют буфер 3. Осадок ресуспендируют на вортексе и центрифугируют при 8000 g в течение 1 мин. Супернатант удаляют, к осадку добавляют 500 мкл буфера 4. Содержимое перемешивают на вортексе, затем центрифугируют при 8000 g в течение 30 сек, супернатант удаляют. Осадок высушивают при температуре 65° С в течение 5-7 мин. К осадку добавляют 30 мкл деионизованной стерильной воды и выдерживают при температуре 65° С в течение 10 мин, периодически встряхивая на вортексе. По окончании взвесь центрифугируют при 8000 g в течение 1 мин; 10 мкл супернатанта используют для проведения реакции обратной транскрипции. 5.3. Проведение реакции обратной транскрипции Обратную транскрипцию РНК проводят с использованием набора «Реверта», обеспечивающего синтез комлементарной ДНК (кДНК), в соответствии с инструкцией фирмы-изготовителя. Пробирки с реакционной смесью, в количестве соответствующим числу проб, переносят в комнату «а», где вносят по 10 мкл каждой пробы экстрагированной РНК, аккуратно перемешивают, инкубируют при 37° С в течение 30 мин. 5.4. Постановка ПЦР Для проведения ПЦР используют две пары праймеров, обеспечивающие амплификацию фрагментов гена РНК-зависимой РНК-полимеразы: 1) CDC1- 5’ – gggttgggactatcctaagtgtga – 3’, CDC2- 5’- ccatcatcagatagaatcatcata – 3', размер ампликонов 440 п.н. (CDC, 2003); 2) SAR1s- 5’ – cctctcttgttcttgctcgca – 3’, SAR1as- 5’ – tatagtgagccgccacacatg – 3’, размер ампликонов 121 п.н. (Drosten C., et al. 2003). ПЦР с каждой парой праймеров проводят в двух отдельных пробирках. Готовят необходимое количество микропробирок объемом 0,6 мл, по 2 пробирки на каждую пробу и одну – для отрицательного контроля, нумеруют их. Реактивы для постановки ПЦР полностью размораживают и перемешивают на вортексе в течение 10 сек. Предварительно в помещении «г» готовят общую реакционную смесь, исходя из того, что на одну реакцию необходимо: Н2О – 14,8 мкл; 2,5 мкл 10 Х Б (0,7 мМ Трис, 0,2 мМ (NH4)2SO4, 0,1 % Твин 20, 200 мкг/мл БСА, рН 8,5); 2,5 мкл дНТФ (2 мМ раствор дАТФ, дГТФ, дЦТФ, дТТФ); 1,0 мкл 50 мМ раствора MgCl2, по 1 мкл каждого праймера с концентрацией 12 пмоль/мкл, 0,2 мкл фермента Taq-полимеразы с концентрацией 5 ед/мкл. Тщательно перемешивают на вортексе и переносят во все пробирки по 23 мкл. Наслаивают на поверхность по 25-30 мкл минерального масла. Пробирки переносят в помещение «б» и во все, кроме контрольной, вносят под масло по 2 мкл полученной кДНК. В пробирку, помеченную как отрицательный контроль, вносят 2 мкл деионизованной воды. При наличии положительного контроля в соответствующую пробирку добавляют 2 мкл положительной кДНК. Пробирки помещают в программируемый термоциклер и проводят амплификацию по следующей программе: 95° С - 3 мин; 10 циклов 94° С – 10 сек, 60° С – 10 сек, (с понижением каждый следующий цикл на 1° С) 72° С – 30 сек; 40 циклов 94° С – 10 сек, 56° С – 10 сек, 72° С – 30 сек; 72° C - 7 мин. Полученные образцы хранят при температуре 4° С. После завершения программы амплификации пробирки переставляют из прибора в штатив, который помещает в контейнер для транспортировки. Контейнер обрабатывает снаружи дезсредством и передают для переноса в комнату «в». ======================== И для SARS, не знаю как с короной был такой вердикт > "Полученный методом ПЦР положительный результат с одной или с двумя парами праймеров не является безусловным доказательством наличия вируса SARS, а проба от данного больного подлежит направлению в специализированный центр для проведения подтверждающего анализа." Это сообщение отредактировал Жирный Принц - 13.11.2020 - 16:20 |
night butterfly |
Дата 13.11.2020 - 16:05
|
||
Unregistered ![]() |
Вот очень интересно кого и каким образоб будут обеспечивать бесплатными лекарствами для лечения от ковида. Я тоже лечилась амбулаторно, но не от ковида, а от ОРВИ, тест бесплатно делать не отправляли, пришлось сделать платно. Когда пришел положительный результат, лечение не скорректировали совсем, просто теперь в карточке будет вместо ОРВИ стоять новая коронавирусная инфекция. А кому и каким образом будут выдавать бесплатные лекарства, если тесты делать никого не отправляют и всех лечат от ОРВИ. |
||
|
Любовьь |
Дата 13.11.2020 - 16:10
|
||||
Личный пацак господина ПЖ ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() Профиль Группа: Пользователи Сообщений: 9502 Пользователь №: 105002 Регистрация: 9.05.2012 - 20:14 ![]() |
Спасибо за информацию. Это интересно. Я была не права и приношу извинения у медиков за примитивное понимание работы лаборатории. |
||||
Любовьь |
Дата 13.11.2020 - 16:20
|
||
Личный пацак господина ПЖ ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() Профиль Группа: Пользователи Сообщений: 9502 Пользователь №: 105002 Регистрация: 9.05.2012 - 20:14 ![]() |
Интересно. У меня все с точностью до наоборот. На бесплатный тест сразу направили, причем и мужа по моей просьбе. Лечат от ковида. Лечат моим иммунитетом. Дай Бог, чтобы он у меня оказался. Тест будет готов через 2-3 недели. Интересно, если тест будет отрицательный, меня через 3 недели начнут лечить антибиотиком, если к тому времени не помру и не поправлюсь? Из симптомов ковида - потеря обоняния после взятия мазка на 1 день. Ничего другого необычного вроде нет. Только Т 10 дней. Такого при ОРВИ вроде не бывало. Про бесплатные лекарства врач не заикалась. Я тоже постеснялась спросить. Кстати! За 2 прихода домой кислород мне тоже не измеряли. А я каждый раз начинала волноваться и забывала спросить. |
||
В_Юлия |
Дата 13.11.2020 - 16:41
|
![]() Личный пацак господина ПЖ ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() Профиль Группа: Пользователи Сообщений: 5563 Пользователь №: 89307 Регистрация: 20.11.2011 - 12:12 ![]() |
Любовьь
Запишите вопросы на листочке, потом по списку и спросите врача. Лекарства надо не просить, а требовать. И уровень кислорода попросите померять. |
Любовьь |
Дата 13.11.2020 - 17:02
|
||
Личный пацак господина ПЖ ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() Профиль Группа: Пользователи Сообщений: 9502 Пользователь №: 105002 Регистрация: 9.05.2012 - 20:14 ![]() |
В_Юлия Спасибо, за совет. Я часто так делаю. А в этот раз чего-то оплошала ![]() И не только со списком. Еще смешная ситуация была с тестом. Паспорт у меня всегда в сумке (по работе иногда нужен). Собираемся с мужем на тест. Чем-то он меня раздраконил, и я его по пути грозно и раздраженно ![]() На след день иду делать ФГ. Женщина передо мной подает в регистратуре паспорт, я спокойно лезу в сумку - а паспорта-то нет. Паника, но приняли без паспорта. Мужу в машине говорю: -Паспорт потеряла.Ты паспорт предъявлял при тестировании? -Предъявлял, но его не взяли. А ты? -А я не помню. Дома все обыскала -паспорта нет. Собралась звонить в инфекционку и вдруг вижу его на полочке, куда вообще не кладу никогда и ничего. Поняла, что пользовалась им из-за СНИЛСа, когда вызов врача делала. Господи, думаю, какое счастье, что его не спросили при тестировании. Представляю реакцию мужа после моего раздраженного вопроса о его паспорте, когда бы меня завернули после часа стояния в очереди. ![]() |
||
night butterfly |
Дата 13.11.2020 - 17:02
|
||||
Unregistered ![]() |
Мне уровень кислорода измеряли первым делом, а лекарства требовать тоже стесняюсь, к тому же думаю, уже пора на выписку готовиться. Второй тест в понедельник по идее пока сдавать. |
||||
|
Любовьь |
Дата 13.11.2020 - 17:10
|
||
Личный пацак господина ПЖ ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() Профиль Группа: Пользователи Сообщений: 9502 Пользователь №: 105002 Регистрация: 9.05.2012 - 20:14 ![]() |
Я уже тут рассказывала. Случайно услышала при тестировании и была озадачена: парень передо мной шел 2 мазок сдавать после первого положительного. Слышу, ему медсестра предлагает взять у него сразу 2 мазка (2-й и 3-й), чтобы не приходить еще раз. Говорит, один мазок отправим сегодня, а второй - в понедельник. Не знаю, может это и нормально? Лишь бы в разных точках поковыряться в носу? А, может, и нарушение. Если нормально, можете тоже попросить взять 2 мазка сразу. |
||
Re-Nata |
Дата 13.11.2020 - 17:57
|
Мама господина ПЖ ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() Профиль Группа: Пользователи Сообщений: 14108 Пользователь №: 33238 Регистрация: 2.10.2008 - 14:27 ![]() |
Ничего не предлагали, ни теста, ни измерить кислород. Только про обоняние поинтересовалась при вызове один раз.
|
cupol77 |
Дата 13.11.2020 - 18:21
|
||
http://www.moswar.ru/r/294059/ ![]() ![]() ![]() Профиль Группа: Пользователи Сообщений: 470 Пользователь №: 89575 Регистрация: 22.11.2011 - 18:30 ![]() |
Видимо вы мало сталкивались с этой Системой. Власть публикует статистику положительных тестов и срочных госпитализаций. А сколько времени сейчас проходит от сдачи теста до получения результата? Вот и получается запаздывание и смазанная картинка. Я отказался от госпитализации 26.10 (положили 14.10, болел с 4.10) когда перестали делать уколы и симптомов не было с неделю. Проявил гражданскую сознательность, освободив койку для более нуждающихся в ней. Тест от 26.10 не прислали до сих пор, вчера сделал контрольный, надеюсь через месяц придет. Это сообщение отредактировал cupol77 - 13.11.2020 - 18:23 |
||
eto-ne-ya |
Дата 13.11.2020 - 18:43
|
||
![]() Мне так удобней ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() Профиль Группа: Пользователи Сообщений: 7892 Пользователь №: 156556 Регистрация: 19.03.2014 - 08:50 ![]() |
Как это не на Арбидол?! Норот в 9 больнице требует Арбидола и Минздрав рекомендует! ![]() |
||
![]() |
![]() ![]() ![]() |
Правила Ярпортала (включая политику обработки персональных данных)
Используя Yarportal.Ru, вы соглашаетесь с правилами (включая политику обработки персональных данных)